Strategia di convalida dei metodi di decontaminazione virale, una rapida panoramica

Anche se si è verificato molti progressi in termini di qualità e conformità in ambito biofarmaceutico, l'industria è ancora impantanata nelle definizioni vaghe di "decontaminazione" molto spesso conduce a amalgami con l'azione di "pulizia" e "disinfezione".

Questa confusione, in particolare nel campo biofarmaceutico degli antigeni infettivi e in particolare dei virus, porta a situazioni di padronanza non tecnica, non conformità e, infine, aumento del rischio di contaminazione incrociata tra i prodotti. Tutto ciò sottolinea l'importanza della chiarezza nel biocontenimento.

Nei primi 2000, l'industria era obbligata a rimuovere la formalina (CMR), che era ampiamente usata come reagente di decontaminazione. I seguenti punti sono rilevanti: (i) la decontaminazione storica ha messo in evidenza la relativa inefficacia della formalina alla luce delle pratiche correnti; (ii) la convalida dell'efficienza delle prestazioni dei decontaminanti è difficile (troppi fattori variabili esterni che influenzano le sue prestazioni); (iii) ha evidenziato la necessità di una revisione approfondita delle prestazioni di tutti gli strumenti e dei processi di decontaminazione. Queste osservazioni sono ulteriormente supportate dalle ambizioni di eradicazione della poliomielite condotte dall'OMS (GAP-III), che ha anche evidenziato queste lacune e debolezze.

Oggigiorno, le tecnologie associate di diversi metodi di decontaminazione (ad esempio, Fisica, Termica, Chimica) sono numerose e possono essere utilizzate nelle industrie biofarmaceutiche e, in particolare, nelle società di vaccinazione. In questo caso, i limiti dell'efficienza e dell'efficacia dei processi di decontaminazione non sono più un'opzione (!) Tuttavia, nuovi vincoli stanno emergendo e richiedono risorse umane e tecniche sostanziali, con impatti sui costi del progetto, forse in modo esponenziale in milioni di euro!

Questo articolo intende servire da "lezioni apprese" e si basa su molti anni di indagini alternative sulla decontaminazione. L'articolo condivide anche la strategia, inizialmente concepita in 2004, che è stata progettata per anticipare il nuovo paradigma di decontaminazione all'avanguardia. Infine, questo articolo sta per essere coinvolto nell'argomento di incompreso


definizioni

È importante chiarire le definizioni farmaceutiche di "pulizia" e "disinfezione" e un'ulteriore spiegazione può essere evidenziata con esempi.

Pulizia
Risultato di un'operazione in un tempo limitato, che consente il ritiro di tutte le sostanze indesiderabili. Il risultato di questa operazione è limitato ai composti presenti al momento delle operazioni.
Questi composti provengono da fonti ambientali naturali o dal prodotto manipolato.
Obiettivi di PULIZIA sono composti inerti (aree di produzione o di laboratorio)

disinfezione:
I risultati di una transazione in un tempo limitato, consentendo il ritiro, l'inattivazione o l'uccisione di tutte le micro-operazioni desiderabili. Il risultato di questa operazione è limitato ai microrganismi presenti al momento delle operazioni (AFNOR NFT 72-101).
Questi microrganismi non sono specifici e provengono da fonti ambientali naturali.
Obiettivi di DISINFEZIONE sono i microrganismi (aree di produzione o di laboratorio).

La definizione di decontaminazione dai due precedenti:
decontaminazione:
Un inattivando, uccidendo o distruggendo tutti i microrganismi specifici. Questi microrganismi sono conosciuti e specifici.
Obiettivi di
DECONTAMINAZIONE controllano i microrganismi (prodotti vaccinali o microrganismi trattati in laboratorio)

In conclusione, l'uso del termine di disinfezione ha un sinonimo di decontaminazione deve essere vietato. Infine, la pulizia non assicura la disinfezione o la decontaminazione. Allo stesso modo, la disinfezione non assicura la decontaminazione o la pulizia.

Strategia di decontaminazione virale
Considerando tutte le tecnologie di decontaminazione (fisica techno, reagenti chimici ...) con meccanismi diversi, che chiameremo "Armi" (vedi tabelle 1 e 2) insieme all'enorme numero di virus, che chiameremo "Obiettivi", l'elenco delle convalide da eseguire può diventare ingestibile, lungo e proibitivo.

Modalità chimiche
Reagenti liquidiIn profondità e / o superficie di decontaminazione
gassosoPrincipalmente superficie di decontaminazione
Modalità fisiche
RadiazioneIn profondità e superficie di decontaminazione
(Pulsed) luceIn profondità e / o superficie di decontaminazione
e-beam(principalmente) decontaminazione di superfici
Modalità termichePrincipalmente utilizzato per la decontaminazione in profondità
(Autoclavi, forno)

Tabella 1: modalità di decontaminazione, che chiameremo "Armi"

Fortunatamente, questi virus possono essere utilizzati in modo simile a (i) La loro incapacità di generare resistenza contro i reagenti chimici (ii) La loro composizione con composti di base 4, Acidi nucleici, amminoacidi, zuccheri e lipidi, che diventano essenzialmente virus piuttosto che virus "scoraggianti".

Considerando questi nuovi paradigmi di proprietà virali, emergono possibilità che includono una "strategia di bracketing" per creare virus che rappresentano gli scenari peggiori. Ovviamente, la regola del bracketing non può essere generalizzata, ma può essere collegata a un razionale scientifico chiaro e forte, una lista di criteri specifici e un elenco di virus specifici. Nell'esempio seguente, verranno analizzati i virus 9 di routine in una società di vaccini (tabella 3).

Dopo aver identificato gli obiettivi e le armi, tutto il "Vincoli" dovrebbe essere identificato.

Dal lato obiettivi:
La disponibilità dell'obiettivo (ossia: livello di concentrazione, fragilità dei microrganismi ...), la disponibilità del contenimento della biosicurezza, la disponibilità dei metodi di quantificazione: sono disponibili, se sì quali sono i loro limiti di rilevazione, la loro robustezza (matrice viro e / o citotossicità)?

Modalità / reagentiTarget principale (s) sulla struttura virale
TemperaturaInvolucro virale, proteine ​​(Glyco), RNA e DNA
Acidi / basiInvolucro virale, proteine ​​(Glyco)
Alcoli / etere Involucro virale, proteine ​​(Glyco)
ossidanti
(Cl-, O3, H2O2, formalina, b-propiolattone ...)
Involucro virale, proteine ​​(Glyco), acidi nucleici
detergenti (ionico / non ionico)Busta virale
Luce UV / pAcidi nucleici, proteine ​​(Glyco)

Tabella 2: modalità di decontaminazione rispetto agli elementi virali biochimici: impatto sulla struttura virale

Dal lato delle armi:
Sono disponibili composizioni di reagenti chimici? (cioè natura e concentrazione di ciascun componente)? Sono disponibili reagenti neutralizzanti corrispondenti? Qual è il loro impatto sui metodi di quantificazione dovuti alla citotossicità?
A causa dei vincoli target (suscettibilità, livello di concentrazione, sistemi di espressione, ecc.), Una delle seguenti strategie è il metodo più efficace per determinare l'efficacia dei parametri di decontaminazione. Il modello di microrganismo deve essere derivato da criteri minimali 3 (i) un'analisi del rischio con le regole ben definite del bracketing. (ii) La disponibilità fisica del modello di potenziale del microrganismo includendo il livello del titolo infettivo coerente con gli obiettivi finali, e iii) il metodo di quantificazione utilizzato (limite di rilevamento inferiore, accuratezza a basso livello, robustezza ...).
Consapevoli di tutti questi elementi chiave, è necessario impostare le specifiche di efficienza. In modo uniforme ed esauriente, mancano (francesi, europei, statunitensi, internazionali ...) e, se forniti, sono limitati e non coprono tutti i casi, in particolare per i virus (Tabella 4). Per quanto riguarda ciascuna modalità di decontaminazione, le specifiche di regolazione non sono così chiare e spesso derivano da esperienze di assicurazione della sterilità, come la famosa "riduzione del registro 6".

In particolare per i target virali, si può trovare la riduzione del log 4 delle infezioni utilizzando la modalità chimica, ma non è appropriato. (A) Decontaminazione della superficie, (ii) Rifiuti liquidi, (iii) rifiuti solidi, (iv) aria? Senza questa guida, è necessaria almeno una bibliografia.
Nella maggior parte dei casi, i parametri efficaci dichiarati sull'etichetta ai fini della decontaminazione non sono appropriati a causa della vasta assenza di informazioni metodologiche e di condizioni ambientali (riduzione 4 Log legata a uno standard ... )

Composizione strutturale
I virus Punte esterne: glicoproteina busta:
fosfolipidi
Core: proteina Genere: RNA Conclusioni seguendo le regole della "strategia di bracketing"
poliovirus (Enterovirus)nonnonVirus nel gruppo 1
Modello rappresentato da Poliovirus
Epatite A (Enterovirus)nonnon
Virus dell'influenza (Influenza)Virus nel gruppo 2

Modello rappresentato dal virus dell'influenza
Morbillo (Morbillivirus)
Virus della parotite (Rubulavirus)
Virus della rosolia (Rubivirus)
Virus di rabbia (Lyssavirus)
sono febbre (Flavivirus)
Dengue (Flavivirus)

Tabella 3: Elenco di 9 considerato virus, che chiameremo "Obiettivi"
Sulla base della struttura biochimica di ciascun virus, qui possiamo definire i modelli 2, in base alle seguenti caratteristiche e ai "vincoli" identificati nelle regole specifiche impostate

Infine, le Strategie di Validazione possono essere riassunte come tali: L'arma giusta contro il bersaglio giusto con la migliore cassetta degli attrezzi, che dovrebbe essere definita in modo specifico. In ogni caso, tutte le (le) specifiche devono essere impostate negli occhi di ciascun uso specifico.

Specifiche di decontaminazione liquida chimica
battericidaNorma franceseAFNOR NF T 72-170 e 171Riduzione del registro 5
norma europea NF EN 1040
sporicidaNorma franceseAFNOR NF T 72-230 e 231Riduzione del registro 5
Fungicida Norma franceseAFNOR NF T 72-200 e 201 Riduzione del registro 4
norma europeaNF EN 1275
virucida Norma franceseAFNOR NF T 72-180, 181 e 185Riduzione del registro 4
norma europeaNF EN, 14675 / 14476 e 13610

Specifiche per decontaminazione chimica dell'aria

battericida Riduzione del registro 5sporicida Norma francese AFNOR NF T 72-281Riduzione del registro 3Fungicida Riduzione del registro 4virucida Riduzione del registro 4
(Novità! Nov.14)

Tabella 4: esempi di norme per l'impostazione delle specifiche

Dopo oltre l'esperienza di 10. Tutti i (nostri) virus sono collegati ai loro parametri di decontaminazione efficienti convalidati, in un sistema conforme, coerente e robusto, realizzando al contempo risparmi attraverso il nostro approccio. Ora ogni nuova potenziale decontaminazione è facile da convalidare e un aggiornamento completo del nostro sistema di decontaminazione per tutti i virus in alcuni esperimenti. Inoltre, la strategia ha portato a una maggiore conformità con osservazioni significative.

La sfida rimanente consiste nell'educare i revisori che non hanno tutti familiarità con le loro nozioni preconcette di complessità virale e la loro piena approvazione delle prestazioni e dell'efficienza di questi approcci.

Lionel GERENTES NB

Dr. Lionel GERENTES, PhD - SANOFI PASTEUR

lionel.gerentes@sanofipasteur.com

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